HPLC液相色譜儀采用了電熱降膜蒸發(fā)原理,即利用已被預(yù)熱(80℃)了的水降淋,在電熱管的外表形成高溫(80℃)液膜并立刻蒸發(fā),產(chǎn)生一次純蒸汽(127℃),并作為下一效的熱源,再經(jīng)過(guò)一次熱交換又產(chǎn)生二次純蒸汽作為下一效的熱源,同時(shí)產(chǎn)生的凝水就是蒸餾水,經(jīng)過(guò)六次熱交換就可使電熱的有效利用率提高了43%。
為了減少HPLC液相色譜儀出現(xiàn)故障的頻率從而延長(zhǎng)其使用壽命,定期的維護(hù)保養(yǎng)十分關(guān)鍵,下面我們來(lái)分享一些正確的維護(hù)保養(yǎng)方法。
1.一切分析準(zhǔn)備工作做好后,依次按順序打開(kāi)穩(wěn)壓電源、高壓輸液泵、柱溫箱、檢測(cè)器,待以上各部件自檢結(jié)束后,打開(kāi)連接儀器的電腦,啟動(dòng)工作軟件。
儀器分析工作結(jié)束后,關(guān)閉工作軟件,再依次按順序關(guān)閉檢測(cè)器、柱溫箱、高壓輸液泵。
2.對(duì)流動(dòng)相的要求
液相色譜所用的流動(dòng)相一般為低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑與水或者緩沖溶液的混合物。為保證液相色譜儀器的正常使用,所有流動(dòng)相必須是色譜級(jí)的,且經(jīng)過(guò)過(guò)濾雜質(zhì)、排除氣泡后裝入干凈的流動(dòng)相貯存瓶中待用。
3.流動(dòng)相的物理性能要求
對(duì)分析物要有足夠的溶解能力,以利于提高檢驗(yàn)的靈敏度;流動(dòng)相的黏度要小,以保證合適的柱降壓;流動(dòng)相的沸點(diǎn)要低,以利于制備分離時(shí)樣品的回收;
4.流動(dòng)相的溫度
一般以硅膠為基質(zhì)的色譜柱高使用溫度不超過(guò)60℃,以低于40℃為宜。溫度過(guò)高會(huì)加速鍵合相水解和硅膠的溶解,從而使填料性質(zhì)改變,柱塌陷,降低柱效。低使用溫度不超過(guò)0℃。
5.流動(dòng)相的過(guò)濾
所有流動(dòng)相在使用前都必須經(jīng)過(guò)0.45μm(或0.22μm)的有機(jī)相/脂溶性和水相(水溶性)濾膜過(guò)濾,以除去雜質(zhì)微粒。
6.流動(dòng)相的脫氣
液相色譜所用到的流動(dòng)相必須預(yù)先脫氣,否則容易在系統(tǒng)內(nèi)產(chǎn)生氣泡,影響泵的工作, 影響基線的穩(wěn)定性。此外,溶解在流動(dòng)相中的氧還可能與樣品、流動(dòng)相反應(yīng)。溶解氧能與某些有機(jī)溶劑(如甲醛、4氫呋喃)形成有紫外吸收的絡(luò)合物,提高背景吸收,會(huì)在梯度洗脫時(shí)造成基線漂移或形成鬼峰。
以上就是HPLC液相色譜儀定期的維護(hù)保養(yǎng)方法,希望能幫助大家更好地使用該儀器。